本文標(biāo)題："標(biāo)記分析細(xì)胞實(shí)驗(yàn)適合使用熒光顯微鏡觀察"
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標(biāo)記分析細(xì)胞實(shí)驗(yàn)適合使用熒光顯微鏡觀察
采用GFP對細(xì)菌標(biāo)記已成為一個普通的方法，然而一個棘手的問題卻很少引起人
們的注意，即GFP及其變種能否指示細(xì)胞活力。
也就是，在顯微鏡下觀察到的所有發(fā)出熒光的GFP標(biāo)記細(xì)胞是否都可以認(rèn)為是活細(xì)胞?
Lowder等報告說，Pseudomonas fluo-rescens的死亡細(xì)胞與GFP從細(xì)胞泄露之間存
在很強(qiáng)的相關(guān)性。
大多數(shù)死細(xì)胞(活力染色法)無GFP熒光，有小比例的細(xì)胞雖然死亡但仍具有綠色熒光。
我們將GFP標(biāo)記S. enlerica細(xì)胞經(jīng)過高溫、干燥或次抓酸鈣等致死因素處理后也得到
了相似的研究結(jié)果。
因此，GFP作為活細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定的熒光物質(zhì)會因細(xì)菌細(xì)胞死亡而迅速消失。但是，
因?yàn)樯贁?shù)熒光細(xì)胞的生理狀態(tài)不清楚，所以在采用GFP標(biāo)記法分析細(xì)胞活力時，最好
是再采用另外一種方法來對結(jié)果進(jìn)行確認(rèn)。
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